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移動方艙實驗室|重要！核酸檢測實驗室污染原因及最權威處理方案

[2021/3/22]

目前國內所有二級以上綜合醫(yī)院都具備了核酸檢測能力，大部分醫(yī)院也設立了PCR實驗室，高強度的核酸檢測任務已然成為了我們檢驗人的工作常態(tài)，但是，如果一旦出現實驗室污染，可能會造成假陽性結果，導致結果不可信，甚至可能會危及實驗室工作人員安全。

應對核酸檢測實驗室污染的最好辦法就是防范于未然，今天就帶大家了解一下實驗中我們如何避免和減少污染的產生以及處理污染。
圖片




一、污染的產生




在新冠病毒核酸檢測過程中 ，常見以下幾種污染類型 ：擴 增片段的污染 （ 產物污染 ） ；天然基因組 DNA 的污染、試劑 污 染 （ 貯存液或工作液 ） 以及樣本間交叉污染 。核酸檢測實驗室 污染的主要來源是擴增產物的污染 。

圖片

實驗室應通過以下途徑及時發(fā)現污染 ：

1、采用每次檢測過程至少3個陰性對照隨機置于臨床樣本中間參與提取全過程。

2、每天對實驗室內空氣進行采樣監(jiān)測�？諝獗O(jiān)測范圍應至少應包括樣本制備區(qū)和擴增產物分析區(qū)。

3、定期對實驗室臺面、門把手、儀器設備表面進行取樣監(jiān)測。

4、陽性樣本采用另外一到兩種更為靈敏且擴增不同區(qū)域的核酸檢測試劑對原始樣本進行復核檢測。




二、污染的防控




01

嚴格實驗室功能分區(qū)


原則上新冠病毒核酸檢測實驗室應當設置以下區(qū)域：試劑儲存和準備區(qū)、樣本制備區(qū)、擴增和產物分析區(qū)。

根據使用儀器的功能，區(qū)域可適當合并。各區(qū)域在物理空間上應當是完全相互獨立的。傳遞窗滿足密封性要求，不能有空氣的直接相通。各項檢測工作應嚴格按相應規(guī)定在各自的區(qū)域內進行，嚴禁在樣本制備區(qū)配制試劑。

圖片

各區(qū)的功能是：

1、試劑儲存和準備區(qū)：貯存試劑的制備、試劑的分裝和擴增反應混合液的制備，以及離心管、吸頭等消耗品的貯存和準備。

2、樣本制備區(qū)：轉運箱的開啟，樣本的滅活（適用時），核酸提取及其加入至擴增反應管等。

3、擴增和產物分析區(qū)：核酸擴增和產物分析。

02

確保實驗室人、物及空氣單向流動


核酸檢測實驗室的人、物及空氣流向按照試劑儲存和準備區(qū)→樣本制備區(qū)→擴增和產物分析區(qū)，防止擴增產物隨人流、物流及空氣進入擴增前的區(qū)域�？諝饬飨驊凑諒脑噭﹥Υ婧蜏蕚鋮^(qū)→樣本制備區(qū)→擴增區(qū)→擴增產物分析區(qū)方向空氣壓力遞減的方式進行。
目前國內所有二級以上綜合醫(yī)院都具備了核酸檢測能力，大部分醫(yī)院也設立了PCR實驗室，高強度的核酸檢測任務已然成為了我們檢驗人的工作常態(tài)，但是，如果一旦出現實驗室污染，可能會造成假陽性結果，導致結果不可信，甚至可能會危及實驗室工作人員安全。

應對核酸檢測實驗室污染的最好辦法就是防范于未然，今天就帶大家了解一下實驗中我們如何避免和減少污染的產生以及處理污染。
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一、污染的產生




在新冠病毒核酸檢測過程中 ，常見以下幾種污染類型 ：擴 增片段的污染 （ 產物污染 ） ；天然基因組 DNA 的污染、試劑 污 染 （ 貯存液或工作液 ） 以及樣本間交叉污染 。核酸檢測實驗室 污染的主要來源是擴增產物的污染 。

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實驗室應通過以下途徑及時發(fā)現污染 ：

1、采用每次檢測過程至少3個陰性對照隨機置于臨床樣本中間參與提取全過程。

2、每天對實驗室內空氣進行采樣監(jiān)測�？諝獗O(jiān)測范圍應至少應包括樣本制備區(qū)和擴增產物分析區(qū)。

3、定期對實驗室臺面、門把手、儀器設備表面進行取樣監(jiān)測。

4、陽性樣本采用另外一到兩種更為靈敏且擴增不同區(qū)域的核酸檢測試劑對原始樣本進行復核檢測。




二、污染的防控




01

嚴格實驗室功能分區(qū)


原則上新冠病毒核酸檢測實驗室應當設置以下區(qū)域：試劑儲存和準備區(qū)、樣本制備區(qū)、擴增和產物分析區(qū)。

根據使用儀器的功能，區(qū)域可適當合并。各區(qū)域在物理空間上應當是完全相互獨立的。傳遞窗滿足密封性要求，不能有空氣的直接相通。各項檢測工作應嚴格按相應規(guī)定在各自的區(qū)域內進行，嚴禁在樣本制備區(qū)配制試劑。

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各區(qū)的功能是：

1、試劑儲存和準備區(qū)：貯存試劑的制備、試劑的分裝和擴增反應混合液的制備，以及離心管、吸頭等消耗品的貯存和準備。

2、樣本制備區(qū)：轉運箱的開啟，樣本的滅活（適用時），核酸提取及其加入至擴增反應管等。

3、擴增和產物分析區(qū)：核酸擴增和產物分析。

02

確保實驗室人、物及空氣單向流動


核酸檢測實驗室的人、物及空氣流向按照試劑儲存和準備區(qū)→樣本制備區(qū)→擴增和產物分析區(qū)，防止擴增產物隨人流、物流及空氣進入擴增前的區(qū)域�？諝饬飨驊凑諒脑噭﹥Υ婧蜏蕚鋮^(qū)→樣本制備區(qū)→擴增區(qū)→擴增產物分析區(qū)方向空氣壓力遞減的方式進行。
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