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細(xì)胞脂質(zhì)過氧的測定

[2015/12/31]

  ()原理細(xì)胞受到氧化性損傷時,脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物丙二醛(MIZ)A)生成量增多,借此可放映受試物或毒物對細(xì)胞損傷的程度。

  ()材料:
  124孔培養(yǎng)板培養(yǎng)的待測細(xì)胞與對照組細(xì)胞。
  2TBA-TCA-HCl溶液 用0.125molL HCl配制16.8TCA溶液,即為TCA-HCl溶液。將416mg硫代巴比妥酸(TBA)溶于.10ml TCA HCl溶液中,即為TBA-TCA-HCl溶液。

  ()方法將細(xì)胞刮下來,連同培養(yǎng)液一起經(jīng)超聲或反復(fù)凍融使細(xì)胞破碎,混勻后取0.3ml,加入2ml TBA-TCA HCl溶液,80℃水浴15min,3000rmin離心10min,取上清液在分光光度計535nm處比色。

  ()結(jié)果與分析
  
計算受試物組細(xì)胞脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物的相對生成量()。
  細(xì)胞脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物的相對生成量越高,則細(xì)胞毒性越低,細(xì)胞脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物的相對生成量越低,則細(xì)胞毒性越高。

  ()注意事項如果吸光度值太低,可將幾個復(fù)孔的細(xì)胞合在一起進(jìn)行測定,或改用更大的培養(yǎng)器皿培養(yǎng)細(xì)胞;也可半量測定, リンク: http://web.sgihara.comナイキ 通販 ナイキ エアジョーダン 激安 モンクレール 通販 即取細(xì)胞裂解液015ml,加1ml TBATCAHCl溶液。


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