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高效液相色譜流動相的性質(zhì)要求

[2013/3/6]

  一個理想的高效液相色譜流動相溶劑應(yīng)具有低粘度、與檢測器兼容性好、易于得到純品和低毒性等特征。

  選好填料(固定相)后,強(qiáng)溶劑使溶質(zhì)在填料表面的吸附減少,相應(yīng)的容量因子k降低;而較弱的溶劑使溶質(zhì)在填料表面吸附增加,相應(yīng)的容量因子k升高。因此,k值是流動相組成的函數(shù)。塔板數(shù)N一般與流動相的粘度成反比。所以選擇流動相時(shí)應(yīng)考慮以下幾個方面:

 、倭鲃酉鄳(yīng)不改變填料的任何性質(zhì)。低交聯(lián)度的離子交換樹脂和排阻色譜填料有時(shí)遇到某些有機(jī)相會溶脹或收縮,從而改變色譜柱填床的性質(zhì)。堿性流動相不能用于硅膠柱系統(tǒng)。酸性流動相不能用于氧化鋁、氧化鎂等吸附劑的柱系統(tǒng)。

 、诩兌取IV柱的壽命與大量流動相通過有關(guān),特別是當(dāng)溶劑所含雜質(zhì)在柱上積累時(shí)。

 、郾仨毰c檢測器匹配。使用UV檢測器時(shí),所用流動相在檢測波長下應(yīng)沒有吸收,或吸收很小。當(dāng)使用示差折光檢測器時(shí),應(yīng)選擇折光系數(shù)與樣品差別較大的溶劑作流動相,以提高靈敏度。

  ④粘度要低(應(yīng)<2cp)。高粘度溶劑會影響溶質(zhì)的擴(kuò)散、傳質(zhì),降低柱效,還會使柱壓降增加,使分離時(shí)間延長。最好選擇沸點(diǎn)在100℃以下的流動相。

 、輰悠返娜芙舛纫m宜。如果溶解度欠佳,樣品會在柱頭沉淀,不但影響了純化分離,且會使柱子惡化。

 、迾悠芬子诨厥铡(yīng)選用揮發(fā)性溶劑。

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